Electronic Theses and Dissertation

Daun kayu putih (Melaleuca leucadendron) diketahui mengandung berbagai metabolit sekunder yang berpotensi sebagai antioksidan dan antiinflamasi. Penelitian ini bertujuan untuk menentukan aktivitas antioksidan dan antiinflamasi dari kelompok fraksi hasil pemisahan ekstrak etil asetat daun M. leucadendron dengan kromatografi kolom gravitasi serta mengidentifikasi senyawa bioaktif. Ekstrak etil asetat diperoleh melalui maserasi dengan metanol sehingga diperoleh ekstrak metanol 255,57 g (36,51%), selanjutnya ekstrak metanol dipartisi dengan n-heksana sehingga diperoleh ekstrak n-heksana 81,55 g (31,91%), dan fraksi metanol hasil partisi dengan n-heksana diekstraksi kembali dengan etil asetat sehingga diperoleh ekstrak etil asetat 86,20 g (33,73%). Ekstrak etil asetat dipisahkan menggunakan kromatografi kolom dengan fase diam silika gel 60G dan fase gerak n-heksana:etil asetat sehingga diperoleh 10 kelompok fraksi Melaleuca leucadendron Etil Asetat (MLEA-A hingga MLEA-J). Aktivitas antioksidan setiap kelompok fraksi diuji menggunakan metode 2,2-difenil-1pikrilhidrazil (DPPH), dan aktivitas antiinflamasi diuji dengan metode antiproteinase. Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak etil asetat dan kelompok fraksi MLEA-E memiliki aktivitas antioksidan sangat kuat dengan nilai IC₅₀ sebesar 4,9 ppm dan 9,4 ppm, mendekati kontrol positif asam askorbat sebesar IC₅₀ 3,9 ppm. Hasil uji antiinflamasi juga menunjukkan bahwa fraksi MLEA-E memiliki aktivitas terbaik dengan nilai IC₅₀ sebesar 107,4 ppm dibandingkan dengan kelompok fraksi lainnya. Analisis LC-HRMS terhadap ekstrak daun M. leucadendron mengidentifikasi berbagai senyawa metabolit sekunder, terutama golongan fenolik dan flavonoid yang diduga berperan dalam aktivitas biologis tersebut. Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa fraksi MLEA-E berpotensi dikembangkan sebagai sumber senyawa alami antioksidan dan antiinflamasi untuk mendukung pengembangan bahan baku fitofarmaka.

Kata kunci: Melaleuca leucadendron, ekstrak etil asetat, MLEA-E, antioksidan, antiinflamasi, Flavonoid.

Melaleuca leucadendron leaves are known to contain various secondary metabolites with potential antioxidant and anti-inflammatory activities. This study aimed to evaluate the antioxidant and anti-inflammatory activities of fractions groups obtained from the separation of the ethyl acetate extract of M. leucadendron leaves using column chromatography and to identify their bioactive compounds. The ethyl acetate extract was obtained through methanolic maceration yielding 255,57 g of methanol extract (36,51%). The methanol extract was partitioned with n-hexane to produce 81.55 g of n-hexane extract (31.91%), while the remaining methanol fraction was re-extracted with ethyl acetate to obtain 86.20 g of ethyl acetate extract (33.73%). The ethyl acetate extract was separated by gravity column chromatography using silica gel 60G as the stationary phase and an n-hexane acetate solvent system as the mobile phase, resulting in ten combined fractions, designated as Melaleuca leucadendron Ethyl Acetate (MLEA-A to MLEA-J). Antioxidant activity of using the 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging assay, while the anti-inflammatory activity was determined using the antiproteinase assay. The results showed that both the ethyl acetate extract and MLEA-E fraction exhibited very strong antioxidant activity with an IC₅₀ value of 4.9 ppm and 9.4 ppm, approaching that of the positive control, ascorbic acid (IC₅₀ = 3.9 ppm). The MLEA-E fraction also demonstrated the highest anti-inflammatory activity, with an IC₅₀ value of 107.4 ppm. LC-HRMS analysis of the M. leucadendron extract identified various secondary metabolites, predominantly phenolic and flavonoid compounds, which are presumed to contribute to the observed biological activities. These findings indicate that the MLEA-E fraction has promising potential as a natural source of antioxidant and anti-inflammatory compounds for the development of phytopharmaceutical raw materials. Keywords: Melaleuca leucadendron, ethyl acetate extract, MLEA-E, antioxidant, anti-inflammatory, Flavonoid.