Electronic Theses and Dissertation

Gajah sumatera (Elephas maximus sumatranus) merupakan satwa endemik Indonesia yang berstatus kritis sehingga memerlukan strategi konservasi berbasis pemantauan kondisi fisiologis, khususnya tingkat stres dan status reproduksi. Parameter fisiologis tersebut dapat dinilai melalui pengukuran hormon kortisol dan progesteron. Namun, metode pengambilan darah bersifat invasif dan berpotensi menimbulkan stres tambahan. Oleh karena itu, saliva digunakan sebagai matriks alternatif yang bersifat minimal invasif serta mencerminkan fraksi hormon bebas yang aktif secara biologis.Penelitian ini bertujuan untuk memvalidasi dan mengaplikasikan kit ELISA komersial kortisol SLV-2930 dan progesteron EIA-1561 dalam pengukuran kadar hormon kortisol dan progesteron pada saliva gajah sumatera, serta mengevaluasi variasi kadar hormon berdasarkan waktu pengambilan sampel pada pagi, siang, dan sore hari. Penelitian menggunakan rancangan eksperimental dengan total 36 sampel saliva yang dikoleksi dari 12 individu gajah sumatera pada tiga waktu pengambilan. Validasi kit ELISA dilakukan melalui uji analitik meliputi parallelism, akurasi, dan presisi. Hasil validasi menunjukkan bahwa kit ELISA kortisol SLV-2930 memiliki kesejajaran kurva yang baik antara sampel dan standar (r = 0,985; p = 0,015), dengan nilai akurasi sebesar 96,26 ± 2,99%. Nilai koefisien variasi (coefficient of variation/CV) intra-assay berkisar antara 5,76–8,85%, sedangkan CV inter-assay berada pada kisaran 4,18–9,56%, yang menunjukkan presisi analitik yang baik. Kit ELISA progesteron EIA-1561 juga menunjukkan hasil validasi yang memadai dengan nilai parallelism yang signifikan (r = 0,979; p = 0,021), akurasi sebesar 99,01 ± 0,02%, serta CV intra-assay 3,73–5,14% dan CV inter-assay 1,91–4,35%. Analisis kadar hormon menunjukkan bahwa kadar kortisol saliva gajah sumatera berbeda sangat signifikan antar waktu pengambilan (P < 0,01), dengan kadar tertinggi ditemukan pada siang hari dibandingkan pagi dan sore hari, sedangkan kadar pagi dan sore hari tidak berbeda nyata (P > 0,05). Sebaliknya, kadar progesteron saliva tidak menunjukkan perbedaan yang signifikan antara pagi, siang, dan sore hari (P > 0,05), yang mengindikasikan bahwa hormon ini lebih dipengaruhi oleh status reproduksi dibandingkan variasi waktu pengambilan harian. Kesimpulannya, hasil penelitian ini menunjukkan bahwa kit ELISA komersial kortisol SLV-2930 dan progesteron EIA-1561 valid dan presisi untuk digunakan pada saliva gajah sumatera. Selain itu, waktu pengambilan sampel (pagi, siang, dan sore hari) berpengaruh terhadap kadar kortisol, tetapi tidak terhadap kadar progesteron.


Kata kunci: Gajah sumatera, kortisol, progesteron, saliva, ELISA, validasi

The Sumatran elephant (Elephas maximus sumatranus) is an endemic Indonesian species classified as critically endangered, thus requiring conservation strategies based on the monitoring of physiological conditions, particularly stress levels and reproductive status. These physiological parameters can be assessed through the measurement of cortisol and progesterone hormones. However, blood sampling is invasive and may induce additional stress. Therefore, saliva was used as an alternative matrix that is minimally invasive and reflects the biologically active free fraction of hormones. This study aimed to validate and apply commercial ELISA kits for cortisol (SLV-2930) and progesterone (EIA-1561) to quantify salivary cortisol and progesterone concentrations in Sumatran elephants, and to evaluate hormonal variations according to sampling time (morning, midday, and afternoon). An experimental design was employed, involving a total of 36 saliva samples collected from 12 individual Sumatran elephants at three different sampling times. Analytical validation of the ELISA kits included assessments of parallelism, accuracy, and precision. The validation results demonstrated that the cortisol ELISA kit SLV-2930 exhibited good curve parallelism between diluted samples and standards (r = 0.985; p = 0.015), with an accuracy of 96.26 ± 2.99%. The intra-assay coefficient of variation (CV) ranged from 5.76% to 8.85%, while the inter-assay CV ranged from 4.18% to 9.56%, indicating good analytical precision. Similarly, the progesterone ELISA kit EIA-1561 showed satisfactory validation performance, with significant parallelism (r = 0.979; p = 0.021), an accuracy of 99.01 ± 0.02%, intra-assay CVs of 3.73–5.14%, and inter-assay CVs of 1.91–4.35%. Hormonal analysis revealed highly significant differences in salivary cortisol concentrations across sampling times (P < 0.01), with the highest levels observed at midday compared to morning and afternoon, while no significant difference was detected between morning and afternoon values (P > 0.05). In contrast, salivary progesterone concentrations did not differ significantly among morning, midday, and afternoon sampling times (P > 0.05), suggesting that progesterone levels are more strongly influenced by reproductive status than by diurnal variation. In conclusion, the commercial ELISA kits for cortisol (SLV-2930) and progesterone (EIA-1561) are valid and precise for use with salivary samples from Sumatran elephants. Furthermore, sampling time significantly affects cortisol concentrations but does not influence progesterone levels. Keywords: Sumatran elephant, cortisol, progesterone, saliva, ELISA, validation