Electronic Theses and Dissertation

Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh suplementasi ekstrak hipofisa dalam media vitrifikasi terhadap kualitas oosit sapi aceh. penelitian ini dilaksanakan secara eksperimental dan terdiri atas tiga rangkaian penelitian. penelitian tahap i bertujuan mengetahui konsentrasi fsh dan lh dalam hipofisa sapi aceh jantan dan kambing lokal jantan yang diekstraksi menggunakan metode ekstraksi yang berbeda. perlakuan yang diberikan yaitu spesies ternak sumber hipofisa (sapi aceh jantan dan kambing lokal jantan) dan metode ekstraksi (metode aquades, metode alkohol-nacl, dan metode bertingkat). ekstrak hipofisa dari kombinasi perlakuan yang terbaik akan digunakan pada penelitian tahap ii dan penelitian tahap iii. data konsentrasi fsh dan lh diolah secara deskriptif dengan menampilkan rataan dan standar deviasi. hasil penelitian tahap i menunjukkan bahwa kelenjar hipofisa sapi aceh memiliki ukuran morfometrik yang lebih besar dibandingkan kambing lokal. metode alkohol-nacl menunjukkan efisiensi tertinggi dalam mengekstraksi fsh dan lh, dan hipofisa sapi memiliki konsentrasi tertinggi yaitu 242,99 miu/ml untuk fsh dan 32,09 miu/ml untuk lh. penelitian tahap ii bertujuan mengetahui pengaruh suplementasi ekstrak hipofisa dalam media vitrifikasi yang dikombinasikan dengan durasi vitrifikasi terhadap kualitas folikel ovarium pascavitrifikasi secara histologis. parameter yang diamati adalah persentase folikel utuh dan diameter folikel rancangan penelitian yang digunakan adalah ral faktorial dengan kombinasi perlakuan konsentrasi ekstrak hipofisa sapi (ehs) dalam media vitrifikasi yaitu 0; 200; 400; 600 μg/ml; dan bovine pituitary extract (bpe) sebanyak 300 μg/ml, dan durasi vitrifikasi selama 0 hari, 7 hari, dan 14 hari. kombinasi perlakuan paling optimal dalam mempertahankan keutuhan folikel dan diameter folikel secara menyeluruh adalah suplementasi ehs 400 μg/ml dengan durasi vitrifikasi selama 7 hari. penelitian tahap iii bertujuan mengetahui pengaruh suplementasi ekstrak hipofisa dalam media vitrifikasi dan durasi vitrifikasi terhadap kualitas ovarium pascavitrifikasi secara imunohistokimia. rancangan penelitian yang digunakan adalah ral faktorial dengan kombinasi perlakuan konsentrasi ehs (0; 200; 400; 600 μg/ml; bpe 300 μg/ml) dan durasi vitrifikasi (0 hari, 7 hari dan 14 hari). parameter yang diamati adalah ekspresi caspase 3, ekspresi fshr dan ekspresi lhr. suplementasi ehs, khususnya pada dosis 600 μg/ml, terbukti efektif dalam menekan apoptosis (caspase-3) dan meningkatkan ekspresi reseptor hormon reproduksi (fshr dan lhr), terutama setelah vitrifikasi selama 7 hingga 14 hari. kesimpulan dari rangkaian penelitian ini menunjukkan bahwa ehs berpotensi sebagai agen stimulan folikular dan protektan ovarium dalam protokol kriopreservasi jaringan ovarium sapi. kata kunci: apoptosis, ekstrak hipofisa sapi, folikel, vitrifikasi

This study aims to determine the effect of pituitary extract supplementation in vitrification media on the quality of Aceh cow oocytes. This study was conducted experimentally and consisted of three series of studies. The first stage of the study aimed to determine the concentrations of FSH and LH in the pituitary glands of male Aceh cattle and male local goats extracted using different extraction methods. The treatments given were the species of livestock from which the pituitary glands were sourced (male Aceh cattle and male local goats) and the extraction methods (aquades method, alcohol-NaCl method, and stepwise method). The pituitary extracts from the best treatment combination will be used in the second and third stages of the study. The FSH and LH concentration data were processed descriptively by displaying the mean and standard deviation. The results of phase I research showed that the pituitary glands of Aceh cattle had larger morphometric sizes than those of local goats. The alcohol-NaCl method showed the highest efficiency in extracting FSH and LH, and bovine pituitary glands had the highest concentrations, namely 242.99 mIU/ml for FSH and 32.09 mIU/ml for LH. Phase II research aimed to determine the effect of pituitary extract supplementation in vitrification media combined with vitrification duration on the histological quality of post-vitrification ovarian follicles. The parameters observed were the percentage of intact follicles and follicle diameter. The research design used was a factorial RAL with a combination of treatments of bovine pituitary extract (BPE) concentrations in the vitrification medium, namely 0; 200; 400; 600 μg/ml; and bovine pituitary extract (BPE) at 300 μg/ml, and vitrification duration of 0 days, 7 days, and 14 days. The most optimal treatment combination in maintaining follicle integrity and follicle diameter overall was supplementation with 400 μg/ml EHS with a vitrification duration of 7 days. The third phase of the study aimed to determine the effect of pituitary extract supplementation in the vitrification medium and vitrification duration on post-vitrification ovarian quality using immunohistochemistry. The research design used was a factorial RAL with a combination of EHS concentration treatments (0; 200; 400; 600 μg/ml; BPE 300 μg/ml) and vitrification duration (0 days, 7 days and 14 days). The parameters observed were caspase 3 expression, FSHR expression, and LHR expression. EHS supplementation, particularly at a dose of 600 μg/ml, was proven to be effective in suppressing apoptosis (caspase-3) and increasing the expression of reproductive hormone receptors (FSHR and LHR), especially after vitrification for 7 to 14 days. The conclusions from this series of studies indicate that EHS has potential as a follicular stimulant and ovarian protector in the cryopreservation protocol for bovine ovarian tissue. Keywords: apoptosis, bovine pituitary extract, follicles, vitrification