Electronic Theses and Dissertation

Andrographis paniculata (sambiloto) merupakan tanaman obat tradisional yang telah menunjukkan aktivitas antivirus dan antiinflamasi yang menjanjikan. Sambiloto dan senyawa aktifnya telah menjadi perhatian peneliti untuk dieksplorasi lebih lanjut. Salah satunya dalam pencegahan keparahan infeksi virus SARS-CoV-2 melalui jalur aktivasi NF-κB p65 beserta pembentukan syncytia akibat infeksi. Penelitian ini bertujuan untuk mengevaluasi aktivitas ekstrak A. paniculata dan senyawa andrograpanin terhadap penghambatan aktivasi NF-κB dan pembentukan syncytia secara in vitro, dengan menggunakan sel model HEK293T yang mengekspresikan protein spike Delta/p65-EGFP berserta protein reseptor ACE2/TMPRSS2. Metode penelitian yang digunakan adalah metode eksperimental menggunakan rancangan acak lengkap (RAL). Pengujian meliputi uji sitotoksisitas ekstrak A. paniculata dan senyawa andrograpanin menggunakan metode MTT assay, konfirmasi transfeksi plasmid target menggunakan IF staining, dan uji penghambatan A. paniculata dan andrograpanin terhadap aktivasi NF-κB serta pembentukan syncytia. Parameter dalam penelitian ini adalah efek sitotoksik ekstrak dan penghambatan aktivasi NF-κB pada pembentukan syncytia. Data MTT, daya penghambatan aktivasi NF-κB serta penghambatan pembentukan syncytia dianalisis dengan ANOVA dan diikuti dengan uji lanjut Tuckey. Hasil analisis ekstrak A. paniculata pada uji MTT menunjukkan bahwa pada konsentrasi 1, 5, 10 dan 100 (μg/ml) menghasilkan viabilitas sel HEK293T lebih dari 85%. Hasil analisis senyawa andrograpanin pada uji MTT menunjukkan bahwa pada konsentrasi 1, 5, 10, 100 dan 200 (Μm) menghasilkan viabilitas sel HEK293T lebih dari 85%. Penelitian ini menunjukkan bahwa ekstrak A. paniculata pada konsentrasi 1 μg/ml mampu menghambat keparahan infeksi akibat SARS-CoV-2 melalui jalur NF-κB p65. Hal ini ditunjukkan dari penurunan yang signifikan dibandingkan dengan kontrol dalam menghambat aktivasi NF-κB. Sedangkan berdasarkan hasil penelitian ini, ekstrak A. paniculata dan senyawa andrograpanin tidak mampu menghambat keparahan infeksi melalui jalur “syncytia formation”. Dengan demikian, penelitian ini menginformasikan bahwa A. paniculata memiliki potensi untuk mengurangi keparahan infeksi virus melalui jalur NF-κB p65, sehingga dapat menjadikannya sebagai kandidat obat untuk melawan infeksi SARS-CoV-2.

Kata kunci: Andrographis paniculata, andrograpanin, syncytia, NF-κB p65

Andrographis paniculata (sambiloto) is a traditional medicinal plant that has shown promising antiviral and anti-inflammatory activities. Sambiloto and its active compounds have been of interest to researchers for further exploration. One of them is in preventing the severity of SARS-CoV-2 virus infection through the NF-κB p65 activation pathway along with the formation of syncytia due to infection. This study aims to evaluate the activity of A. paniculata extract and andrograpanin compound on the inhibition of NF-κB activation and syncytia formation in vitro, using HEK293T cell model that expresses Delta/p65-EGFP spike protein along with ACE2/TMPRSS2 receptor protein. The research method used is an experimental method using a complete randomized design (RAL). Tests include cytotoxicity tests of A. paniculata extracts and andrograpanin compounds using the MTT assay method, confirmation of target plasmid transfection using IF staining, and inhibition tests of A. paniculata and andrograpanin against NF-κB activation and syncytia formation. The parameters in this study were the cytotoxic effect of the extracts and the inhibition of NF-κB activation on syncytia formation. MTT data, inhibition of NF-κB activation and inhibition of syncytia formation were analyzed by ANOVA and followed by Tuckey's further test. The results of the analysis of A. paniculata extract in the MTT test showed that at concentrations of 1, 5, 10 and 100 (μg/ml) resulted in HEK293T cell viability of more than 85%. The results of the analysis of andrograpanin compounds in the MTT test showed that at concentrations of 1, 5, 10, 100 and 200 (Μm) produced HEK293T cell viability of more than 85%. This study shows that A. paniculata extract at a concentration of 1 μg/ml is able to inhibit the severity of infection due to SARS-CoV-2 through the NF-κB p65 pathway. This is indicated by a significant decrease compared to the control in inhibiting NF-κB activation. Meanwhile, based on the results of this study, A. paniculata extract and andrograpanin compound were not able to inhibit the severity of infection through the “syncytia formation” pathway. As a result, this study informs that A. paniculata has the potential to reduce the severity of viral infection through the NF-κB p65 pathway, which could make it a drug candidate against SARS-CoV-2 infection. Keywords: Andrographis paniculata, andrograpanin, syncytia, NF-κB p65